Meddelelse vedrørende laboratoriemetoden for salmonella i fersk svine-, okse-, samt fjerkrækød, der eksporteres til Sverige

Bilag 3

FLOWDIAGRAM OVER ISOLATION AF SALMONELLA

5 prøver af 25 g i 1125 ml peptonbuffer, subsidiært

4 prøver a 25 i 900 ml peptonbuffer.

Inkuberes ved 37 grader C +- 1 grad C i 18-24 timer.

Deraf 0,1 ml i 10 ml Rappaport-Vassiliadis-bouillon.

Inkuberes ved 41,5 grader C (+- 0,5 grader C) i 20-24 timer.

Hvirvles op. Med et stort podeøje (2,5-3 mm) udstryges på

Rambach eller BLSF agar.

Rambach plader inkuberes ved 37 grader C i 18-24 timer.

Prøverne (Rappaport-Vassiliadis) inkuberes

igen ved 41,5 grader C i 20-24 timer.

Ved overvoksede Rambach eller BLSF plader eller formodning om,

at der er Salmonella tilstede, foretages endnu en udstrygning

efter 20-24 timer fra Rappaport-Vassiliadis opformering.

Suspekte kolonier stikkes i TSJ og lysin-jern-agar og inkuberes

ved 37 grader C i 18-24 timer.

Materiale fra TSJ benyttes til agglutination med

Polyvalent-Salmonella-O-antiserum.

Det skal sikres, at den undersøgte koloni ikke er spontan-

agglutinabel ved afprøvning af reaktionen i en fysiologisk

saltvandsopløsning.

Den isolerede bakteriestamme indsendes til typebestemmelse på

Statens Veterinære Serumlaboratorium.

Meddelelse vedrørende laboratoriemetoden for salmonella i fersk svine-, okse-, samt fjerkrækød, der eksporteres til Sverige

Til samtlige eksportautoriserede svine-, kreatur-, og fjerkræslagterier, opskæringsvirksomheder og frysehuse samt veterinærkontrollen ved disse.

Vedrørende laboratoriemetoden ved undersøgelse for Salmonella i

fersk svine-, okse-, samt fjerkrækød, der eksporteres til Sverige.

Med cirkulæreskrivelse den 23. november 1993, J.nr. 5 a 561-97-0/91, meddelte Veterinærdirektoratet nye retningslinier for den frivillige kontrolordning med forekomst af Salmonella i fersk kød og fersk fjerkrækød, der eksporteres til Sverige.

Den ved cirkulæreskrivelsen vedlagte laboratorieforskrift, bilag 2, dateret 23. november 1993, Laboratoriemetode til påvisning af Salmonella i fersk kød og fersk fjerkrækød, herunder vurdering af analyseresultatet, er ved en beklagelig fejltagelse ikke den gældende foreskrift.

Under henvisning hertil fremsendes den gældende foreskrift, bilag 2, J.nr. 5 a 561-97-0/91, Laboratoriemetode til påvisning af Salmonella i fersk kød og fersk fjerkrækød, herunder vurdering af analyseresultatet, dateret den 20. december 1993, som erstatter og ugyldiggør bilag 2, dateret den 23. november 1993.

P.V.V.

e.b.

J. Valentin Petersen

Afdeling for kødkontrol J.nr. 5a 561-97-0/91 20. december 1993 Bilag 2

Laboratoriemetode til påvisning af Salmonella i fersk kød, herunder vurdering af analyseresultater.

Metodik

Som angivet i NMKL nr. 71, 4. udgave, 1991 med følgende ændringer og præciseringer

Pkt. 4.1: Sterilisering foretages ved 121 grader C +- 1 grad C i 15 minutter.

Pkt. 4.2.: Ved opformering skal der benyttes Rappaport-Vassiliadisboullion af enten mærket MERCK nr. 7700 eller mærket OXOID nr. CM 866. Mærket OXOID nr. CM 669 er derimod mindre velegnet.

Pkt. 7.1: Prøverne modtages på laboratoriet indpakket i stomacherposer (højst 5 prøver i hver pose).

Pkt. 7.2 og 7.2.1: Der foretages normal præopformering, efter at der er tilsat peptonbuffer (pkt. 4.1) i forholdet 1 del prøve til 9 dele peptonbuffer. Er der 5 prøver a ca. 25 g tilsættes 1125 ml peptonbuffer. Såfremt stomacherposens volumenkapacitet er utilstrækkelig til 5 prøver, samles prøver under pkt. 7.1 i stedet 4 ad gangen, og der tilsættes 900 ml peptonbuffer.

Stomacherposen med indhold kan inkuberes i overensstemmelse med pkt. 7.2.3. Såfremt inkuberingen af stomacherposen giver praktiske vanskeligheder, overføres indholdet af stomacherposen til en 1 liter steril RED CAP, og der tilsættes peptonbuffer. RED CAP med indhold inkuberes i overensstemmelse med pkt. 7.2.3.

Pkt. 7.4: Som fast seleketiv/indikativt substrat benyttes enten Rambach agarplade eller BLSF.

Inkubation ved 37 grader C +- 1 grad C i 18-24 timer.

Pkt. 7.5: Rambach-agerpladen: Røde, svagt røde og rosa kolonier bedømmes som Salmonella-suspekte.

Pkt. 7.6: Fra BLSF/Rambach-agarpladen podes suspekte kolonier og stikkes i TSJ og lysin-jern-agar. Typisk reaktion i TSJ er rød/gul/luft/sværtning og typisk reaktion i lysinjern-agar er lilla/lilla/luft/sværtning.

Fra TSJ foretages agglutination med O-antiserum. Typisk Salmonellareaktion er agglutination med O-antiserum.

Det skal bemærkes, at enkelte Salmonella-typer har atypiske reaktioner.

Den isolerende bakteriestamme indsendes til typebestemmelse på Statens Veterinære Serumlaboratorium. Ved indsendelse skal det angives hvorfra bakteriestammen er isoleret, J.nr. 5a 561-97-0/91, samt virksomhedens autorisationsnummer. Ved problemer med blandingsflora, samt atypiske reaktioner skal Veterinærdirektoratets Laboratorium, Ringsted, kontaktes.

I bilag 3, FLOWDIAGRAM OVER ISOLATION AF SALMONELLA, er givet en oversigt over laboratoriemetoden til påvisning af Salmonella i fersk kød.

GLP og kvalitetskontrol

De laboratoriemæssige undersøgelser skal ske under iagttagelse af god laboratoriemæssig praksis samt kvalitetskontrol. Der skal henvises til »Veterinærdirektoratets håndbog for mikrobiologiske laboratorier - en vejledning om god laboratoriemæssig praksis (GLP) og kvalitetskontrol ved mikrobiologiske laboratorier«. Særlig opmærksomhed skal rettes mod kontrol af temperaturen i termostater, samt at der ved den interne kvalitetskontrol altid køres med såvel positiv som negativ kontrol.

For at kunne dokumentere, at meddelte analyseresultater er tilvejebragt på en kvalitetsmæssig tilfredsstillende måde, er det nødvendigt, at alle betydende data vedrørende prøveudtagning, herunder prøvens identitet, undersøgelsesprogram, anvendt apparatur m.v., bliver registreret.

Vedrørende Weekend.

Da de kritiske steder i analysen er præopformeringen i peptonbuffer, og den selektive opformering i Rappaport-Vassiliadis, kan Salmonella-undersøgelsen påbegyndes mandag-onsdag. Inkuberede BLSF/Rambach agarplader flyttes fra 37 grader C termostat lørdag, til køleskab. Hvis laboreatoriet har lørdagsvagt, kan Salmonella-undersøgelsen endvidere påbegyndes torsdag. Inkuberede BLSF/Rambach plader bliver da stående i 37 grader C termostat indtil mandag (d.v.s. højst 2 dage).

Prøverne udtaget sidst på ugen (fredag og eventuelt torsdag) opbevares i køleskab indtil mandag.

Ingen